制品内容

Qizyme HiFi DNA Polymerase （2 U / µl） 50 µl (250ul)

5× Qizyme HiFi Reaction Buffer 1 ml (5ml)

dNTP Mixture（10 mM） 100 µl (500ul)

产品简介

Qizyme HiFi DNA Polymerase是一种超保真DNA聚合酶， 该酶具有优越的可靠性和高特异性， 适合扩增长链DNA，并且显著地减少PCR延伸时间。通过改良提高了持续合成能力和PCR扩增速率，结合该酶的3’-5’核酸外切酶活性使得其保真性是普通Taq酶的50倍。而该酶的独特结构使其即便在有PCR抑制剂存在的情况下，也能快速有效的得到目的产物。该酶PCR扩增产物为平末端。

贮存溶液

20 mM Tris-HCl（pH7.4 @ 25°C），100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，稳定剂，50% 甘油。

保存：-20 °C

优势

1）保真度高：确保PCR复制的精确程度

2）快速：延伸时间短（15-30秒/ kb）

3）方便：功能强劲，只需最少的优化

4）高产量：用更少的酶，获得更高的产量

用途

1）高保真PCR

2）快速菌落PCR

3）高通量PCR

4）克隆

PCR产物

使用Qizyme HiFi DNA Polymerase扩增的产物为平末端，如果产物用于克隆，建议使用平末端连接。如果需

要进行T / A克隆， 在加A之前需要纯化DNA， 引入Qizyme HiFi DNA Polymerase会降解产生的突出端。

反应条件

50 µl反应体系中含有：1× Reaction Buffer，DNA模板，0.2 µM上游引物，0.2 µM下游引物，0.2 mM dNTP，1 U Qizyme HiFi DNA Polymerase。

单位定义

一个单位 Qizyme HiFi DNA聚合酶可在 74 °C，在 30 分钟内向不溶于酸材料中掺入 10 nmol脱氧核糖核苷酸。

PCR反应液组成 (Total 50 µl)

组分	使用量	终浓度
Qizyme HiFiDNA Polymerase	0.5µl	1.0 U/50µl
Primer1（10 µM）	1µl	0.2 µM
Primer2（10 µM）	1µl	0.2 µM
DNA	<250 ng	<250 ng
dNTPs (10mM)	1µl	200 µM
5×Qizyme HiFiReaction Buffer	10µl	1×
ddH2O	Up to 50µl

注意：PCR反应建立后，将反应物上下颠倒混匀，短暂离心将液体收集到管底。如果使用的PCR循环仪没有加热盖，可在样品上覆盖矿物油。PCR反应条件 （举例）

循环步骤	温度	时间
预变性	98°C	30 s
25-35 Cycles	98°C Tm°C 72°C	10 s 20 s 15-30 s/1kb
终延伸	72°C	5-10 min
保存	4-10°C